黄精根系VA真菌侵染情况其对黄精生长影响,该文是关于黄精论文范文，为你的论文写作提供相关论文资料参考。
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摘 要 采用菌根应用技术,对黄精根系VA真菌的侵染情况及其对黄精生长效应的影响进行研究.结果表明,从黄精根际土壤分离到地球囊霉和摩西球囊霉菌根真菌,土壤含孢量为20.6个/g；黄精根系AM真菌菌丝感染率为17.4%、丛枝感染率为3.1%、泡囊成群分布；孢子接种量不同,黄精生长效应存在差异,说明黄精对VA菌根真菌存在依赖性.
关键词 VA菌根；黄精；侵染情况；生长效应；影响
中图分类号 S567.2 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2017）19-0057-02
VA菌根是一种常见的内生菌根,因其菌丝体在胞内呈丛枝状（Arbuscular）和泡囊状（Vese-icular）而得名[1].由于部分真菌产生丛枝但不产生泡囊,故统称为丛枝菌根（AM）.我国VA菌根真菌广泛存在于各种生态环境中,资源丰富,生态适应性强.其能和绝大多数植物共生,有促进水分和养分吸收利用、提高抗病性、增强耐盐碱和重金属的耐性、提高产量、改善品质,对于实现植物根际土壤生态系统的可持续发展具有重要的实践价值[2].
黄精[Polygonatum cirrhifolium（Wall.）Royle]为百合科黄精属多年生草本植物的干燥根茎.别名老虎姜、鸡头参,始载于《名医别录》,列为上品,黄精味甘,性平.归脾、肺、肾经.具有补气养阴、健脾、润肺、益肾功能.其性平和,作用缓慢,可作久服滋补之品,自古以来一直被视为延年益寿的珍贵中药,是老年人较理想的补养之品.作为传统名贵中药,近年来,由于黄精新药研制和保健品开发,而野生资源缺乏,人工栽培黄精已成为供求主体.本文对黄精根系VA真菌的侵染情况进行研究,观察其对黄精生长的影响.现将试验结果总结如下.
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试植物.黄精,采自重庆南川三泉镇境内自然环境生长的新鲜植株,同时采集其根际土壤.由重庆市药物种植研究所提供黄精有性种子.
1.1.2 供试菌剂.AM菌剂孢子是课题组采用“湿筛倾析法”分离[3],在体视显微镜下,从黄精根际土壤0～30 cm深处的土壤中挑取而得.
1.1.3 供试土壤.质地为砂壤土,含速效磷3.22 mg/kg、速效氮52.87 mg/kg、有机质2.01%、速效钾104.8 mg/kg、pH值6.7.土壤田间含水量为18%.土壤经高压湿热灭菌（θ等于121℃ φ等于0.1 MPa）2 h,冷却备用.每钵装2 kg灭菌土.供试盆栽钵为棕色塑料常规盆栽钵.
1.2 试验方法
1.2.1 黄精AM菌根侵染调查.①根样采集.将根样洗净,将须根先端约1 cm的根段剪下,放入FAA固定液中进行固定,保存备用.②染色制片.根据参考文献[4] 绍的方法进行制片.③菌根感染率的测定.用测微尺测定感染根段长（含有VA真菌菌丝、泡囊、丛枝、孢子之一者为感染根段）.用Kuwada长度测量软件测量根段长,计算公式[5]如下：
菌根感染率（%）等于（VA菌根感染根段长÷观察根段长）
侵染等级划分标准：菌根侵染率0%～5%为 ；6%～25%为2级；26%～50%为3级；51%～75%为4级；76%～100%为5级.
将制片移至Olympus显微镜下进行照相,便于观察清晰的泡囊、菌丝、丛枝、孢子或分枝状吸收结构等,并做好记录.
1.2.2 黄精根际土壤AM真菌含孢量测定及分离鉴定.取带根土样进行混合阴干,称取3份各100 g,用湿筛倾析法分离孢子,将获得的湿筛孢子混合物洗入培养皿中,在体视显微镜下统计计数,计算每1 g阴干土中的孢子数量.在解剖显微镜下依据孢子形态、大小及颜色初步归类,将同类孢子用毛细管或粘有水的拔针转移到载玻片上,将孢子调整到最佳位置,再观察孢子的颜色、形状及大小.后加盖玻片将孢子压破,在显微镜下观察孢壁总厚度、连孢菌丝等特征,参照Schenck和Perez（1988）的VA菌根手冊进行分类鉴定.
1.2.3 黄精盆栽接种AM真菌对生长效应的影响.将湿筛倾斜法分离提取的真菌孢子,在体视显微镜下挑取细胞质均匀一致的生活AMF孢子,42 kHz超声水浴振荡片刻去掉孢子表面杂物,蒸馏水漂洗数次后,将孢子转入Φ 3.0 cm的小玻璃培养皿中,滴加5%氯化铵T-0.04%链霉素-吐温20液[5],盖好上皿,孢子表面消毒15 min,灭菌蒸馏水漂洗干净,4 ℃冰箱保存备用.分别采用200、400、800、1 200个AMF孢子接种1 kg土壤,以灭菌土壤不接种作对照（CK）,3次重复,每钵播种3粒黄精种子,播期2015年2月10日,播后覆土,灭菌蒸馏水浇透.出苗时定苗1株,常规管理.
2 结果和分析
2.1 黄精AM菌根形态观察
由图1可知,黄精丛枝菌根根内孢子呈圆形或近圆形,显微镜下呈浅 ,表面光滑；泡囊近椭圆形,颜色较深.观察到根内孢子,但相对较少,而泡囊作为营养繁殖体较为丰富.从制片观察到黄精根内菌丝和丛枝分布稀疏,丛枝相对更少.根据计算结果,菌丝和丛枝感染率分别为17.4%、3.1%.由此表明,VA菌根真菌侵染黄精幼根形成了菌根,为菌根药用植物,但感染率不高,这可能和土壤性质、植物本身性质及VA真菌资源等有关,有必要开展AM真菌接种试验.
2.2 黄精根际土壤AM菌根真菌孢子密度及种类
统计结果表明,每1 g土壤中含有20.6个孢子,根据其形态、颜色及大小分为2类：一类孢子形态结构描述为：孢子单生,黄棕色,近圆形,大小250～280 μm.孢壁光滑,孢壁总厚度11 μm,可分3层：外层无色透明,厚约1 m,成熟后常脱落；第2层黄棕色层状壁,8 μm；最内层淡 膜状壁,厚约1 μm,连孢菌丝淡 或淡黄棕色,直桶形,菌丝宽13～26 μm.连点处有隔,由内壁封闭；另一类孢子形态结构描述为孢子单生,棕色,圆形,孢子表面光滑,大小160～260 μm,孢子壁2层,外层为浅 层状壁,厚5 μm,总厚度10 μm.2层紧贴在一起不易分开.连点宽26 μm,距连点下方5 μm有加厚呈柱状的菌丝壁（基部微喇叭形）,连丝内部有厚—凹形弯隔.根据鉴定结果,该孢子为地球囊霉（G. geospora Gerdemann,J.W and J.M.Trappe）和摩西球囊霉（G.mosseae Gerd&Trappe）,地球囊霉孢子和摩西球囊霉孢子平均每1 g土壤含14.4个和6.2个,分别占总数的69.90%和30.10%.黄精根际土壤AM真菌种群丰度为2（种群丰度—指一个中药材根际土壤中所含VA菌根真菌种的数量）.
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