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关于除草剂论文范文写作 转EPSPS基因抗除草剂棉花在杂交制种中应用相关论文写作资料

主题:除草剂论文写作 时间:2024-02-11

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摘 要:以转EPSPS基因抗除草剂棉花种质为父本,以不具有除草剂抗性的普通陆地棉种质为母本,实施不去雄直接授粉配置杂交组合,并继而对其F1代杂交种苗期进行除草剂筛选鉴定,据此探讨出一种简化制种方法.SSR分子标记检测结果表明,该方法可以得到100%纯度的杂交种.该方法进一步改良后可以结合营养钵育苗在棉花杂交制种中推广,在简化制种技术上有重要利用价值.

关键词:棉花;EPSPS基因;除草剂;赤霉素;简化制种

中图分类号:S562.035.1文献标识号:A文章编号:1001-4942(2018)03-0029-04

Abstract In this paper, a simplified method of cotton hybrid seed production was discussed. The EPSPS transgenic cotton with herbicide resistance was used as the male parent, and the normal upland cotton germplasm was used as the female parent to carry out cotton seed production through direct pollination without castration, and then the F1 hybrids with herbicide resistance were screened out at seedling stage. The SSR molecular marker detection results showed that the simplified seed production method could produce 100% pure hybrids. This method can be further improved and popularize in the hybrid seed production of cotton with the combination of seedling nursing with nutrient bowl, which will have important utilization value in simplified seed production technology.

Keywords Cotton; EPSPS gene; Herbicide; Gibberellin; Simplified seed production

種植抗除草剂棉花可以扩大棉田杀草谱,使田间杂草防除变得简便易行,是降低除草成本、提高植棉效益的有效途径[1].草甘膦(glyphosate) 是目前广泛应用的内吸型广谱性除草剂,它通过抑制植物体内芳香族氨基酸合成途径中的5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(5-enolpyruvyl-shikimate-3-phosphate synthase,EPSPS)的活性,阻断芳香族氨基酸的合成,从而杀灭杂草,对植物无选择性[2].国内外科技工作者先后创制出转G6-EPSPS、CP4-EPSPS、GR79-EPSPS等基因的抗除草剂棉花种质[4-6],为培育具有我国自主知识产权的抗草甘膦棉花品种奠定了基础.研究表明特定浓度的草甘膦可以诱导转EPSPS基因棉花产生雄性不育,因此在棉花育种及杂交制种中研究较多,可用于简化制种[7-11].然而此前的研究均是以抗除草剂棉花作为母本进行简化制种,但抗除草剂棉花只作母本也限制了 优势的充分利用.本研究拟初步探讨一种以转EPSPS基因棉花种质作父本进行简化制种的方法,为抗草甘膦棉花育种应用以及商业化生产提供依据.

1 材料和方法

1.1 试验材料

抗除草剂棉花品系R02及R118:利用引自浙江大学以中棉所49为受体的转G6-EPSPS基因的原始抗除草剂材料,和本课题组自育材料回交转育而成.

非抗草甘膦品系为G35:本课题组自育材料.

除草剂:41%农达(孟山都公司生产的草甘膦).

1.2 试验方法

1.2.1 组合配制 2016年将R02、R118和G35种植于山东棉花研究中心临清试验站,管理措施同大田.共有两组杂交组合,组合1为G35×R02,组合2为G35×R118.

母本处理方式分为两种,即处理A为对照,不喷施赤霉素;处理B为现蕾后15 d,用浓度为100 mg/kg的赤霉素整株均匀喷施,此后每隔10 d喷施同等浓度赤霉素1次,共喷3次.试验用赤霉素为Sigma公司生产的分析纯G7645.

母本开花后不去雄,用父本直接进行人工授粉,并在盛花期调查母本两个处理下连续20棵棉花的柱头长度.

1.2.2 田间除草剂筛选鉴定 2017年将亲本R02、R118和G35及上年度获得的4组杂交种种植于山东棉花研究中心临清试验站,每个材料种植3行,面积为20 m2.

在苗期选择晴朗天气用100倍41%农达除草剂喷施叶片,3 d后观察表型.G35和非抗单株叶片边缘皱缩枯萎,R02、R118和抗性单株叶片无变化.对表型进行统计, 中抗性单株标记为真 .

1.2.3 室内分子鉴定 提取全部抗性单株及亲本DNA,利用棉花基因组SSR标记对杂交种真伪性进行分子鉴定.棉花基因组DNA提取采用简化的CTAB法[12],DNA用1×TE溶解,稀释到50 ng/μL备用.选择多态性好的核心引物用于杂交种分子鉴定[13-15],SSR标记序列来自棉花标记公共数据库CMD(http://www.cottonmarker.org/),引物由上海铂尚生物科技有限公司合成.

结论:关于本文可作为相关专业除草剂论文写作研究的大学硕士与本科毕业论文自制除草剂2天见效论文开题报告范文和职称论文参考文献资料。

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