数字PCR技术其在食品源性成分鉴定中应用,该文是关于数字PCR技术论文范文，为你的论文写作提供相关论文资料参考。
数字PCR技术论文参考文献：
摘 要：随着全球食品工业的蓬勃发展,食品掺假及 现象日趋严重,因此对相关检测技术的开发及应用需求日益迫切.数字PCR（dPCR）是近年发展起来的一种对核酸进行精确定量的全新方法,不仅能对食品源性成分进行精准定性,更重要的是可对不同来源的掺假成分进行定量分析,因此,相对于目前源性成分鉴定中广泛应用的实时荧光PCR（qPCR）,它的应用前景更为广阔.本文阐述了dPCR的发展历程、特点和原理,并对dPCR发展中遇到的问题进行探讨.在此基础上就dPCR技术在食品源性成分鉴定中的原理和应用进行了综述,并就该技术在此领域的应用前景进行了展望.
关键词：数字PCR（dPCR）；食品；源性成分；鉴定；应用
中图分类号：S126文献标识号：A文章编号：1001-4942（2018）04-0160-06
Abstract With the rapid development of food industry in global, the phenomenon of food adulteration and counterfeiting is being more and more serious. Thus, the development and application requirements for related detection technology are urgent. Digital PCR （dPCR） is a new developed precise quantitative method for nucleic counting in recent year. It can not only accurately determine the ingredients of food sources, but also can be used for quantitative analysis of adulterated ingredients from different sources. Therefore, compared with the real-time fluorescence PCR （qPCR）, which is widely used in the source components identification at present, it has a wider application prospect. In this paper,we elaborated the development, characteristics and principles of dPCR, and probed the problems encountered during the developing process. On these bases, the principle and application of dPCR technology in the source component identification were reviewed, and its application prospect in this field was also analysed.
Keywords Digital PCR （dPCR）； Food； Derived ingredient； Identification； Application
近幾年,数字PCR（dPCR）从产生到应用,得到了快速的发展.该技术可简单概括为“微化分析”：一个样品被稀释和分割至最多包含一个目标序列拷贝的百万甚至数百万独立反应室中,通过计算“阳性”反应（能够检测到的序列）和 “阴性”反应的数量,从而确定样本中DNA分子的绝对拷贝数.因此,dPCR具有广泛的应用范围,应用于医学、生物学等多个分支,如医学临床诊断方面的癌症因子检测[1-4]、病毒检测[5-7]、抗药性分析[8]、致病基因拷贝数检测[9-12]以及突变检测[13-16]等,生物学研究方面的基因表达分析[17-20]、基因型鉴定[21-23]、测序分析[24-26]、转基因成分分析[27, 28]以及微生物检测[29,30]等.
数字PCR的概念在1992年首次被提出[31],几年后,约翰霍普金斯大学的Bert Vogelstein和Ken Kinzler将之命名为“数字PCR”,并表明它可以用来量化大肠癌患者粪便中和疾病相关的基因突变.理论虽然简单,实现却困难重重.最初,实验在市售的每个分区为5 μL的带有384孔的孔板上进行.由于实验需要大量的试剂,当时许多科学家对该项技术的推广应用持有怀疑态度[32].
如今,纳米加工和微流体技术取得了很大进步,使生产成千上万纳升甚至皮升级别的分区系统成为可能.目前主流商业化产品主要应用两种不同方法进行分区, Fluidigm 和Life Technologies 擅长利用芯片在板内创建反应室,而Bio-Rad 和 RainDance则是将试剂隔离成独立的微滴.这使dPCR技术的应用变成了现实.
在高额利润和快速金钱回报的驱使下,食品掺假问题已成为一种持续性的社会问题,大量的假冒伪劣食品充斥市场.传统的源性成分检测方法主要依靠普通PCR或荧光定量PCR（qPCR）,这些方法现阶段应用虽较为成熟,但仍有缺陷：一是传统方法步骤较为复杂[33-36]；二是仍有很多不可消除的因素严重制约着传统方法在食品源性成分检测上的准确性,如PCR扩增的效率、非特异目的基因的背景干扰以及内参照基因的选取等等[37,38]；三是传统方法无法进行精确定量.dPCR技术在食品检测领域的应用正好可弥补以上缺陷.商业化dPCR技术的出现和应用使其在食品安全检测领域发挥的作用越来越大.本文对该技术的发展历史和原理进行了详细阐述,在此基础上介绍了该技术在食品源性成分检测领域的进展,旨在为该技术在食品领域的应用提供参考和新思路.
结论：关于本文可作为数字PCR技术方面的大学硕士与本科毕业论文数字pcr技术意义论文开题报告范文和职称论文论文写作参考文献下载。
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