胶东半岛地区番茄褪绿病毒快速检测和鉴定,此文是一篇胶东半岛论文范文,为你的毕业论文写作提供有价值的参考。
胶东半岛论文参考文献：
摘 要：番茄褪绿病毒（Tomato chlorosis virus,ToCV）是最近传入我国的重要植物病毒,可通过媒介昆虫烟粉虱传播.为了探索利用媒介昆虫快速、高效检测该病毒的方法,本研究对胶东半岛重要蔬菜产区青岛和烟台两地烟粉虱体内ToCV进行检测和鉴定.结果表明：该地区烟粉虱种群体内均可检测到ToCV,说明利用媒介昆虫烟粉虱可以快速检测该入侵病毒.
关键词：番茄褪绿病毒；烟粉虱；检测；生物入侵
中图分类号：S436.412.1+1文献标识号：A文章编号：1001-4942（2015）02-0086-04
AbstractTomato chlorosis virus （ToCV） has been recently introduced into China. It can be transmitted by its insect vector, Bemisia tabaci. In order to explore a rapid and efficient method for its detection through insect vector, the ToCV was detected and identified in B. tabaci from Qingdao and Yantai, the two major vegetable-producing regions of Jiaodong Peninsula. The results showed that ToCV could be detected in B. tabaci from the two regions, which indicated that the method was rapid and efficient to detect the introduced virus.
Key wordsTomato chlorosis virus （ToCV）； Bemisia tabaci； Detection； Biological invasion
番茄褪绿病毒病是影响番茄、辣椒等茄科蔬菜生长和产业发展的重要病害.番茄褪绿病毒（Tomato chlorosis virus,ToCV）隶属长线形病毒科（Closteroviridae）毛形病毒属（Crinivirus）,最早发现于佛罗里达州北部温室的番茄植株上1, 2,现已在世界很多地区发生为害,包括美州、欧洲、非洲及亚洲地区3～7.ToCV可侵染许多植物,除番茄、辣椒等茄科植物外,还可侵染其它13个属的30种植物,包括一些重要的农作物、观赏性植物和杂草8～12.ToCV侵染寄主植物后,导致植物叶脉间黄化,叶片变厚、变脆易碎,叶边缘轻微上卷,叶片呈古铜色或叶脉间有坏死斑点10.该病毒不能通过机械摩擦传毒,只能依靠媒介昆虫粉虱传播,包括温室 虱（Trialeurodes vaporariorum）、纹翅粉虱（Trialeurodes abutilonea）和烟粉虱（Bemisia tabaci）（包括A型和B型）13.传播ToCV的媒介昆虫如烟粉虱等寄主范围十分广泛,可以在不同病毒植株和健康植株之间扩散,加快了该病毒的蔓延危害.
在中国,ToCV于2012年首次在北京市甜椒植株上发现14.随后,在山东省的寿光、泰安、聊城等地区番茄植株上发现,发病率达20%～100%,番茄减产10%～40%,并导致番茄果实品质下降,造成严重的经济损失15.ToCV田间检测通常是通过观察病害症状,然后将带有疑似症状植株带回实验室进行鉴定.由于ToCV侵染寄主植物后有较长的潜伏期,通常侵染后3～4周内无明显症状,难以被发现；一旦发现,往往已延误病毒的检测和防治8.因此,早期检测对于ToCV的防控具有重要价值,加强对该病毒快速有效的检测技术研究迫在眉睫.
媒介昆虫是天然的“病毒贮存器、注射器”,利用媒介昆虫检测植物病毒是一条快速检测植物病毒的途径16, 17.本研究对胶东半岛重要蔬菜产区青岛和烟台两地烟粉虱体内ToCV进行了检测,这对于遏制该病毒的扩散蔓延以及控制具有重要价值.同时,ToCV在胶东半岛首次发现,对胶东半岛ToCV的防治具有重要的指导价值.
1材料和方法
1.1样品采集
2014年7月从山东青岛和烟台两地的蔬菜大棚中采集烟粉虱活体成虫（均为辣椒和番茄混合种群）.采集后成虫一部分直接用于提取DNA,一部分直接用于提取RNA,其余存于-80℃冰箱备用.
1.2烟粉虱隐种鉴定
单头烟粉虱DNA提取参照褚栋等18的方法.利用mtCOI基因对山东省青岛和烟台两地采集的烟粉虱进行隐种鉴定19.烟粉虱mtCOI片段扩增产物利用Vsp Ⅰ酶进行酶切,酶切后使用1.0%的琼脂糖凝胶电泳进行检测,记录结果.每个种群检测20头.
1.3烟粉虱总RNA的提取
利用TRIzol法提取烟粉虱总RNA,将60头烟粉虱置于1 mL TRIzol中,利用玻璃匀浆器将烟粉虱充分研磨,将研磨液转移到1.5 mL离心管,室温静止10 min,加入20%体积的氯仿,充分振荡30 s,静止10 min,4℃、12 000 r/min离心12 min,将上清转入1.5 mL离心管,加入等体积的异丙醇,摇匀后静止10 min,4℃、12 000 r/min离心12 min,离心后弃上清,用75%的乙醇洗涤沉淀,最后用无核酸酶的去离子水溶解.每60头为一个重复,每地区重复3次.
1.4反转录PCR、序列克隆及测序
反转录试剂使用PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser（TaKaRa,大连）,按照试剂盒说明进行反转录操作,反转录的总RNA为1 μg,反转录体系为20 μL.将反转录得到的cDNA用Dovas等4报道的检测ToCV的特异引物进行PCR,扩增ToCV编码的HSP70h基因部分序列.PCR产物经1.2%琼脂糖凝胶电泳检测,使用凝胶回收试剂盒挖胶回收460 bp左右的目标条带,回收产物克隆到pMD18-T载体（TaKaRa,大连）.转化大肠杆菌TOP10,阳性克隆经验证后由上海生工生物工程有限公司进行测序获得序列.
结论：关于对不知道怎么写胶东半岛论文范文课题研究的大学硕士、相关本科毕业论文胶东人与鲁西人的差别论文开题报告范文和文献综述及职称论文的作为参考文献资料下载。
烟台地区番茄嫁接育苗技术要点
一、砧木选择砧木应当比接穗具有更强的环境适应能力，耐旱、耐涝、耐热、耐寒、抗病虫等，尤其对某些土传病虫害免疫或高抗。因此，要求砧木根系发达，耐。
胶东半岛服装产业转型升级困境和
摘要：服装业是中国轻工业主导行业之一，然而，我国服装产业多处于价值链的中低端，缺乏自主品牌创新，多以贴牌加工为主。笔者通过调研发现胶东半岛服装产。
山东省蓝色经济区背景下，胶东半岛海洋经济比较分析
摘 要：在“蓝色经济区”的规划下，青岛、烟台、威海三个城市海洋经济发展较快，都出现了“雷同化”问题，都存在对海洋资源的过度开发，对海洋环境的破环。
独立前马来半岛地区安全形势演变
摘要：马来半岛，地处中南半岛最南端，是太平洋和印度洋的分界线，在近现代史上有着独特且重要的地缘政治地位，其安全形势也随外部环境的变化而变化。本文。